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诺如病毒希望论文范文文献 诺如病毒研究希望

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王大鹏

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食品中诺如病毒的检测

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王大鹏,上海交通大学农业与生物学院副研究员,硕士研究生导师。主要从事食源性致病微生物的污染与控制,包括致病微生物分子生态、流行病学监测、快速检测方法和致病机理等研究工作。

近年来, 媒体曝光了多起因诺如病毒(Norovirus,以下简称“NoV”)污染导致的食品安全事件,目前,美国、英国、法国、德国、日本、澳大利亚、中国等诸多国家都有NoV 感染的报道。NoV 每年可导致全球1.25 亿人次感染和3.5 万人死亡,且发病量逐年攀升。通过对我国27 个省份173 家哨点门诊2009 年~2013 年腹泻病例的调查可以发现,NoV 感染率高达11.6%(病例总数为34031,NoV 感染病例为3950)。每年NoV 导致全球直接经济损失42 亿美元,社会经济损失603 亿美元(其中,5 岁以下婴幼儿耗费398 亿美元)。所以,NoV的防控已经成为各国疾控部门关注的焦点之一。

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1968 年冬天,美国诺瓦克镇的一所小学暴发了一起非细菌性急性肠胃炎事件,该事件导致学校半数以上学生出现急性呕吐、腹泻的症状,但是没有鉴定出诱发该疾病的主要病原。直到1972 年,美国科学家以免疫电镜的方法证实4 年前暴发急性肠胃炎的罪魁祸首是一种小个子病毒,并将其命名为诺瓦克病毒(Norwalkvirus);后来,各国科学家都发现了类似的病原,以致该病毒有了很多别称,如诺瓦克病毒(Norwalk virus)、类诺瓦克病毒(Norwalk-likevirus)或小圆状病毒(small round structuredvirus)等。时至2002 年,国际病毒分类委员会(The International Committee on Taxonomyof Viruses,简称ICTV)根据病毒的形态、抗原特性及遗传进化等特点将其归入嵌杯状病毒科,并正式更名为诺如病毒(Noroviurs,简称NoV)。

NoV 隶属于嵌杯病毒科诺如病毒属,病毒颗粒直径27~34nm,无囊膜,属单股正链RNA病毒,容易发生变异。病毒基因组7.5~7.8kb,共编码3 个开放阅读框(ORF1-ORF3)。其中,ORF1 编码6 个非结构蛋白;ORF2 和ORF3 分别编码结构蛋白VP1(主要衣壳蛋白)和VP2(次要衣壳蛋白)。根据NoV 主要衣壳蛋白编码区(ORF2)核苷酸序列的不同,将该病毒分为GI-GVII 共7 组,其中GI(GI 1-9)、GII(GII1-22,其中11/18 和19 为猪源)和GIV 组为人类易感,GIII 为牛源,GV 为鼠源,GVI 和GVII为犬源。因此,严格来讲,仅有GI、GII 和GIV组NoV 可以感染人类,被通称为人源诺如病毒(human Norovirus,以下简称hNoV),其中流行毒株基因型为GII.4,可感染所有人群。另外,为了纪念1968 年首次暴发NoV 感染,将NoV原型毒株(GI.1)仍称为诺瓦克病毒(Norwalkvirus)。但是,该毒株不感染B 型血人群。

hNoV 研究已经成为全球热点, 但其研究进展非常缓慢。2014~2016 年,Jones 和Ettayebi 等人分别以B 细胞和人肠道上皮细胞培养物成功地实现了hNoV 体外培养,然而这两种增殖体系仍有诸多局限性。迄今,除鼠源NoV 外,NoV 暂无成熟的体外增殖体系。所以,建立病毒体外培养体系是深入研究hNoV 的关键。

hNoV 的感染和传播

hNoV 具有致病率高、感染剂量低、对外界抵抗力强等特点,是全球诱发急性非细菌性胃肠炎最重要的食源性病毒。hNoV 感染的临床症状表现为:喷射状呕吐、腹泻、腹痛、偶尔伴有发烧。hNoV 感染后潜伏期短,感染后24~28 小时会表现出典型症状,持续12~24 小时,病程1~7 天;hNoV 患者排毒时间长,在患者粪便中的检出时间可以持续数周。以上特性是hNoV 经常在学校、医院、游轮等较封闭的人员密集场所暴发疫情的根本原因。

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hNoV 传播途径广泛,主要通过粪- 口途径进行传播,亦可经食源、水源和气溶胶传播。常见果蔬(草莓、生菜等)和贝类(牡蛎、青口螺等)已被列为hNoV 污染的高风险食品。经研究发现,生菜叶面、叶脉和气孔中均可携带hNoV(见图1);牡蛎胃组织、消化盲囊、鳃组织和上前纤毛等均可吸附hNoV,其中胃组织中可以特异性结合病毒颗粒(见图2)。因此,在处理和食用hNoV 污染的食品时,需注意饮食卫生并尽可能避免交叉污染。

hNoV 的检测和防控

hNoV 呈现出全世界范围频发且各地发病率出现逐年增高的趋势,这与人们对其认识的深入、检测方法灵敏度显著提高有关。迄今为止,hNoV 的检测方法分别建立在病毒粒子外形、特异性核酸区段和主要抗原决定簇的基础上,主要有电镜法、免疫学方法和分子检测法。其中,分子检测方法因其应用性好、灵敏度高等特点引起了广泛的研究。但是,传统的分子检测方法无法区分样品的扩增模板是来自于完整的病毒颗粒还是游离的病毒核酸。我们建立了原位捕捉实时定量反转录方法,该方法以hNoV 受体捕获病毒颗粒,再以捕获病毒颗粒的基因组为模板进行核酸扩增,破解了上述技术瓶颈。另外,该方法不需要提取病毒核酸,且可以规模化批量检测,这为hNoV 的监测提供了一个新选择。

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hNoV 通常在半封闭环境( 如幼儿园、敬老院、宾馆、军队、学校和游艇等) 中暴发,并且可以感染各年龄阶段的人群( 老年人和婴幼儿更易感染),严重影响了人们的身体健康。各国的疾控部门也做出了各种努力来降低病毒对人类的影响,但是均未提出有效的防控方法。

目前,主要通过以下几种方式降低hNoV感染率:①注意个人卫生,饭前便后要充分洗手;②尽量不吃生食(尤其是贝类);③即食性水果尽量削皮或进行消毒处理;④如果需要处理因hNoV 感染导致的呕吐物和腹泻物,可以使用5~10 倍日常餐具消毒浓度的84 消毒液与污物混合,10~20 分钟后再对污物进行清理;如果有条件,可以佩戴口罩和手套进行个人防护。另外,hNoV 患者应注意以下几项要点:①自觉隔离静养;②无需惊慌,安心静养,一般3 天内会自愈;③注意避免脱水,补充电解质和维生素;④不要从事任何食品生产,且毛巾、碗筷等需额外加热消毒处理。

参考范文:

[1]计算机病毒检测技术

[2]网络环境下的计算机病毒其防范技术

[3]基于在线社会网络的病毒性营销传播机理

结束语

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